• HPLC系統關(guān)鍵部件的選擇與優(yōu)化

    [2024/5/23]

    一、輸液泵的選擇與優(yōu)化

    輸液泵,作為HPLC(高效液相色譜)系統的心臟,其性能直接決定了整個(gè)系統的穩定性和分析結果的可靠性。在選擇輸液泵時(shí),我們需要考慮以下關(guān)鍵性能:

    1. 流量穩定性:RSD(相對標準偏差)應小于0.5%,這對于確保定性和定量分析的準確性至關(guān)重要。
    2. 流量范圍:分析型輸液泵應具備0.1至10 ml/min的連續可調范圍,而制備型則能達到100 ml/min或更高。
    3. 輸出壓力:一般應能達到150至300 bar(約1500至3000 kg/cm²),以確保在各種色譜柱和流動(dòng)相條件下均能穩定運行。
    4. 液缸容積:優(yōu)先選擇液缸容積小的泵,便于清洗和更換流動(dòng)相,特別適用于再循環(huán)和梯度洗脫。
    5. 密封與耐腐蝕性能:泵應具有良好的密封性和耐腐蝕性能,以確保長(cháng)期穩定運行。

    在泵的類(lèi)型選擇上,目前應用最多的是柱塞往復泵。其優(yōu)點(diǎn)包括液缸容積小、流量調節方便、泵壓高等。為克服其輸出的脈沖性,可采用雙泵系統(并聯(lián)或串聯(lián))。并聯(lián)式雙泵在流量重現性上表現更佳,但價(jià)格較高,且故障率相對較高。

    二、進(jìn)樣器的選擇與優(yōu)化

    進(jìn)樣器是HPLC系統中連接樣品和色譜柱的橋梁,其性能同樣關(guān)鍵。在選擇進(jìn)樣器時(shí),我們需要關(guān)注以下方面:

    1. 密封性:進(jìn)樣器應具有良好的密封性能,以防止樣品泄漏和污染。
    2. 死體積:較小的死體積有助于提高柱效和分離度。
    3. 重復性:進(jìn)樣器的重復性直接影響分析結果的可靠性。
    4. 進(jìn)樣方式:HPLC進(jìn)樣方式包括隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣等。不同的進(jìn)樣方式適用于不同的分析需求。
    • 隔膜進(jìn)樣:適用于常規分析,但不適合高壓條件,且存在記憶效應和耐溶劑問(wèn)題。
    • 停流進(jìn)樣:可避免高壓進(jìn)樣,但存在“鬼峰”和保留時(shí)間不準的問(wèn)題。
    • 閥進(jìn)樣:耐高壓、進(jìn)樣量準確、重復性好,是HPLC分析中常用的進(jìn)樣方式。
    • 自動(dòng)進(jìn)樣:適用于大批量樣品的常規分析,可大幅提高分析效率。

    綜上所述,在選擇和優(yōu)化HPLC系統的關(guān)鍵部件時(shí),我們需要綜合考慮其性能、適用范圍和成本等因素,以確保系統的高效、準確和穩定運行。